FITC-Dextran 70 (FD70) FITC標記葡聚糖

FITC-Dextran 70 (FD70) FITC標記葡聚糖（70 kDa）

產(chǎn)品標簽

FITC-Dextran FITC標記葡聚糖；FD40； FD70；TRITC-dextran 羅丹明標記葡聚糖；TD40；TD70；microcirculation 微循環(huán)研究；Cell permeability 細胞滲透性研究；Microfluorimetry 顯微熒光測定法；

產(chǎn)品信息

【變更說明】：FITC-Dextran 70 (FD70)自2018.6月開始產(chǎn)品貨號由原來的MS0995變更為MS0905。

產(chǎn)品描述

FITC標記葡聚糖（FITC-Dextran）是以天然葡聚糖B512F限制水解和分級純化制備的不同分子量葡聚糖為底物，經(jīng)熒光素標記所得的合成探針。熒光素基團通過一個穩(wěn)定的硫代氨甲酰鍵連接到葡聚糖上（見附錄圖1. FITC-Dextran分子片段的結(jié)構(gòu)特征），此標記步驟不會引起任何的葡聚糖降解。FITC-Dextran內(nèi)每個葡萄糖單位含0.002~0.008 mol FITC，這一低水平的替換確保葡聚糖最小的結(jié)構(gòu)變化，這一特性對滲透性研究來說是最基本需求。

FITC標記葡聚糖（FITC-Dextran）廣泛用于微循環(huán)和細胞通透性研究，通過熒光顯微測定法來檢測。還可用于植物細胞壁多孔性和毛細血管通透性研究。小分子量的FITC-Dextran也能用來測定比如內(nèi)吞和細胞連接通透性的生理過程。FITC-Dextran 70 (FD70)可能用作一種模式化合物來開發(fā)輸送分子到原生質(zhì)體的方法，或者用來研究水凝膠和脂質(zhì)體等結(jié)構(gòu)內(nèi)的藥物釋放過程。也許還能用在微血管和單細胞層通透性研究。血漿蛋白不會結(jié)合FITC-Dextran。

本品是對平均分子量約70kDa葡聚糖進行標記的熒光素衍生物，即異硫氰酸熒光素葡聚糖70（fluorescein isothiocyanate dextran 70, FITC-dextran, FD70），以凍干粉形式提供，易溶于水，最大激發(fā)和發(fā)射波長分別為493和518nm。

產(chǎn)品特性

1）   CAS NO：60842-46-8

2）   化學名：Dextran(3′,6′dihydroxy-3-oxospiro(isobenzofuran-1(3H),9′-[9H]xanthen]-5(or 6)-yl)carbamothioate

, average Mw of approximately 70,000

3）   同義名：Fluorescein isothiocyanate-dextran 70; Fluoresceinyl thiocarbamoyl-dextran 70;

4）   分子量：average Mw 59,000-77,000

5）   置換率：0.002~0.008 mol FITC/glucose unit

6）   外觀：黃色至深橘色粉末

7）   溶解性：易溶于水或鹽溶液，也溶于DMSO，甲酰胺和某些其他極性有機溶劑，不溶于更低的脂肪醇、丙酮、氯仿和二甲基甲酰胺（DMF）

8）   光譜特性：Ex/Em=493/518nm【由于熒光素基團的電荷狀態(tài)依賴于緩沖液的pH和離子強度，因此熒光強度也會因這些參數(shù)的變化而變化。pH＞8觀察到最大熒光強度。生理緩沖液能顯著影響熒光強度，或得到增加或受到抑制。見附錄圖2. pH 4-9范圍內(nèi)FITC-Dextran 70的熒光變化（Em=520nm）】

保存與運輸方法

保存：室溫避光短期保存，2-8℃避光長期保存，保持密封干燥，至少3年穩(wěn)定。

運輸：室溫運輸。

產(chǎn)品穩(wěn)定性

綜合各種溶液體系和溫度下FITC-Dextrans的穩(wěn)定性測定，總的來說，體內(nèi)外FITC-Dextrans的穩(wěn)定性非常優(yōu)秀。僅當pH＞9和上升溫度內(nèi)熒光素可能存在水解的風險。兔血漿、肌肉勻漿液、肝臟勻漿液和尿液內(nèi)的FITC-Dextrans在37℃，至少3天內(nèi)保持穩(wěn)定，分子量不會發(fā)生變化，且未發(fā)現(xiàn)熒光素基團的釋放。6%三氯乙saun內(nèi)FITC-Dextrans室溫穩(wěn)定保存3天。【文獻來源：P. Kurtzhals, C. Larsen and M. Johansen, High performance size-exclusion chromatographic procedure for the determination of fluoresceinyl isothiocyanate dextrans of various molecular masses in biological media. J Chromatogr, 491(1989), 117-127.】

硫代氨甲酰鍵的水解產(chǎn)生4-或5-氨基熒光素，能立即被HPLC定量檢測到。未發(fā)表的研究數(shù)據(jù)顯示，將高壓處理的FITC-Dextran 70溶液置于8-50℃長達5個月，發(fā)現(xiàn)僅在50℃情況下可能觀察到微量（1%）的自由氨基熒光素含量增加。單獨進行高壓處理會引起2.7%的自由氨基熒光素產(chǎn)生。

其他的未發(fā)表研究顯示，F(xiàn)ITC-Dextran在pH4溶液35℃內(nèi)能穩(wěn)定保存高達1年。而在pH4，80℃內(nèi)硫代氨甲酰鍵穩(wěn)定30min，可能觀察到葡聚糖的降解。pH9，35℃內(nèi)存放一個月以上會發(fā)生一定量（24%）的熒光衰減。

一些研究證明，F(xiàn)ITC-Dextrans在持續(xù)性實驗（1-6天）的體內(nèi)穩(wěn)定性。【文獻來源：N. Thorball, FITC-dextran tracers in microcirculatory and permeability studies using combined fluorescence Stereo Microscopy, Fluorescence Stereo-microscopy and electron microscopy, Histochemistry, 71(1981), 209-233.】

注意事項

1）  FITC-Dextrans易溶于水或鹽溶液，可根據(jù)實際使用濃度配制適當濃度的母液。

2）  FITC-Dextrans溶液高壓滅菌可能導致少量氨基熒光素的釋放，若需要無菌，建議用過濾的方法來除菌。

3）  為了您的安全和健康，請穿實驗服并戴一次性手套操作。

附錄

圖1. FITC-Dextran分子片段的結(jié)構(gòu)特征

圖2. pH 4-9范圍內(nèi)FITC-Dextran 70的熒光變化（Em=520nm）

 參考文獻

[1]Tang, X., Yan, K., Wang, Y. et al. Activation of PPAR-β/δ Attenuates Brain Injury by Suppressing Inflammation and Apoptosis in a Collagenase-Induced Intracerebral Hemorrhage Mouse Model. Neurochem Res 45, 837–850 (2020).

[2]BBB permeability was also evaluated using 70 kDa FITC-dextran. Mice (n?=?5/group) were injected with 70 kDa FITC-dextran (MS0905; MKbio, Shanghai, China) in PBS at 50 mg/kg into the tail vein. Animals were perfused with pre-chilled PBS 15 min after the dextran injection. Following perfusion, the brain tissue was removed, homogenized with 20% trichloroacetic acid, and centrifuged at 12,000 rpm for 10 min. The supernatant was isolated, and relative fluorescence was measured at excitation and emission wavelengths of 493 and 520 nm. The results were calculated using FITC-dextran as the standard, and the values are expressed as ng/g brain tissue.

— —Written/Edited by V. Shallan【版權(quán)歸MKBio懋康所有】

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