Y1HGold酵母化學感受態細胞
簡要描述：
Y1HGold酵母化學感受態細胞是Clontech GAL4-AbA酵母單雜交系統用的菌株，MATα型，能直接轉化質粒進行文庫篩選。Y1HGold-GAL4酵母單雜交系統需要兩種質粒配套使用，分別為pAbAi和pGADT7。
產品時間：2024-03-20
打印當前頁Y1HGold Chemically Competent Cell
酵母菌化學感受態細胞
溫馨提示
見我司（懋康生物）整理的酵母雙雜交（Yeast two-hybrid assay）產品專題。
產品關鍵詞：
GAL4-AbA酵母單雜交系統；Y1HGold；pAbAi；pGADT7；Ar Qual；X-α-Gal ；Aureobasidin A （AbA）；金擔子素；
產品訂購：
貨號 | 產品名稱 | 規格 | 價格（元） |
MF2362-1000UL | Y1HGold Chemically Competent Cell 酵母菌化學感受態細胞 | 10×100μl | 290 |
MF2362-5000UL | Y1HGold Chemically Competent Cell 酵母菌化學感受態細胞 | 50×100μl | 1320 |
產品組分：
組分編號 | 組分名稱 | 保存 | 貨號（規格） | |
MF2362-1000UL | MF2362-5000UL | |||
MF2362-A | Y1HGold Competent Cell | -80℃ | 10×100μl | 50×100μl |
MF2362-B | pGADT7 Control Vector (10ng/μl) | -80℃ | 10μl | 10μl |
MF2362-C | Carrier DNA (5μg/μl) | -20℃ | 100μl | 500μl |
MF2362-D | PEG/LiAC Solution | +4℃ | 5ml | 25ml |
產品描述
酵母單雜交是在酵母雙雜交的基礎上發展起來，不同于雙雜交用來研究蛋白-蛋白間的相互作用，單雜交主要用于研究蛋白和DNA的相互作用。
Y1HGold是Clontech GAL4-AbA酵母單雜交系統用的菌株，MATα型，能直接轉化質粒進行文庫篩選。
Y1HGold-GAL4酵母單雜交系統需要兩種質粒配套使用，分別為pAbAi和pGADT7。前者篩選標志為Ura，用于表達pBait-AbAi構建子（通過將bait-DNA 單拷貝或串聯重復序列克隆到pAbAi載體所得）；后者篩選標志為Leu，用于表達GAL4 AD與誘捕蛋白（prey）的融合蛋白。Y1HGold-GAL4酵母單雜交系統的工作原理在于：基因組整合有pBait-AbAi的酵母報告菌株，當誘捕蛋白（prey）結合到誘餌序列（bait-DNA），GAL4 AD會激活AUR1-C報告基因的表達，這一表達使得細胞能夠在含篩選抗生素金擔子素（Aureobasidin A，AbA）的培養基上生長。與傳統的營養缺陷報告基因相比，AUR1-C（AbAr）在很低濃度（100-200 ng/ml）下即可以有效殺死非抗性克隆，大大降低背景克隆生長。這一優勢也可降低酵母單雜交假陽性發生的概率。
本品為經特殊工藝制備的Y1HGold酵母菌化學感受態細胞，用pGADT7質粒檢測轉化效率＞104cfu/μg DNA。且在-80℃能穩定保存三個月。
基因型
MATα, ura3-52, his3-200, ade2-101, trp1-901, leu2-3, 112, gal4Δ, gal80Δ, met-, MEL1
使用方法
- 取100 µl冰上融化的Y1HGold化學感受態細胞，依次加入預冷的目的質粒2-5 µg，Carrier DNA （95-100℃ 孵育5 min，快速冰浴。重復一次。）10 µl，PEG/LiAc 500µl，用槍吹打幾次充分混勻，30℃水浴30 min（在15min時翻轉6-8次混勻）。
- 之后將管子放42℃水浴15 min（在7.5min時翻轉6-8次混勻）。
- 5000 rpm離心40s棄上清，用400 µl ddH2O重懸沉淀，離心30s棄上清。
- 用50 µl ddH2O重懸，涂板，放入恒溫培養箱29℃培養48-96 h。
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MS6320-10G | DO Supplement -His/-Leu | 10g |
MS6334-10G | DO Supplement -Leu/-Met/-Trp | 10g |
MS6342-10G | DO Supplement -His/-Leu/-Met/-Trp | 10g |
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— —Written/Edited by V. Shallan【版權歸MKBio懋康所有】
上海懋康生物科技有限公司是一家涉足于生命科學和生物技術領域研究的試劑、儀器和實驗室消耗品與實驗服務工作，主要從事細胞生物學、植物學、分子生物學、免疫學、生物化學、蛋白組學。生物制藥與診斷試劑研發生產等領域。 本公司秉承“以人為本，以誠為信、合同守信”的經營理念。堅持"品質保障"的原則為廣大客戶提供優質產品。
Y1HGold酵母化學感受態細胞
Y1HGold酵母化學感受態細胞