• <blockquote id="gl1u1"></blockquote>
    • <pre id="gl1u1"></pre>

          国产精品边做奶水狂喷无码,亚洲国产日本韩国欧美mv,无码国模国产在线观看,国产乱码一二三区精品,特级毛片内射www无码,无码制服丝袜人妻ol在线视频,亚洲成色在线综合网站免费,少妇被粗大的猛烈进出69影院一
          歡迎光臨上海懋康生物科技有限公司
          主頁 > 技術文章 > 潮霉素B Hygromycin B的使用方法總結
          技術文章
          潮霉素B Hygromycin B的使用方法總結
             潮霉素B Hygromycin B的使用方法總結

            1. 儲存液的配制(50mg/ml)

            稱取0.5g 潮霉素B加入10ml無菌去離子水內使其*溶解。先用5ml無菌去離子水預濕潤0.22μm針頭式過濾器,除盡水。之后使用此濾器過濾潮霉素B溶液,除菌后分裝成單次使用的小量(如1ml)放到-20℃凍存,約1年穩定。

            2. 常用篩選濃度

            注意:潮霉素B用來篩選穩轉株的工作濃度需要根據細胞類型,培養基,生長條件和細胞代謝率而變化,推薦使用濃度為50-1000μg/mL。對于*次使用的實驗體系建議通過建立殺滅曲線(kill curve),即劑量反應性曲線,來確定*篩選濃度。

            一般而言,哺乳動物細胞50-500μg/mL;細菌/植物細胞20-200μg/mL;真菌300-1000μg/mL。

            3. 殺滅曲線的建立

            注意:為了篩選得到穩定表達目的蛋白的細胞株,需要確定能夠殺死未轉染宿主細胞的抗生素zui低濃度,可通過建立殺滅曲線(劑量反應曲線)來實現,至少選擇5個濃度。

            1) *天:未轉化的細胞按照20-25%的細胞密度鋪在合適的培養板上,37℃,CO2培養過夜;注:對于需要更高密度來檢測活力的細胞,可增加接種量。

            2) 根據細胞類型,設定合適范圍內的濃度梯度。以哺乳動物細胞為例,可設定50,100,250,500,750,1000μg/mL。先用去離子水按照1:10的比例將母液稀釋到5 mg/ml,然后按照下表稀釋到相應濃度的工作液。

            3) 第二天:替換舊的培養基,換用新鮮配制的含有相應濃度藥物的培養基。每個濃度做三個平行孔。

            4) 接下來每3-4天更換新的含藥物培養基。

            5) 按照固定的周期(如每2天)進行活細胞計數來確定阻止未轉染細胞生長的恰當濃度。選擇在理想的天數(通常是7-10天)內能夠殺死絕大多數細胞的zui低濃度為穩定轉染細胞篩選用的工作濃度。

          • © 2019 上海懋康生物科技有限公司 版權所有 技術支持:環保在線
          • 電 話:18616957973 傳 真:86-021-54736159 QQ號碼:1563822900 郵 箱:2971634497@qq.com 地 址:上海市閔行區虹梅南路2588號綠亮科創園1幢A棟321室
          • 備案號:滬ICP備16016464號-3 總訪問量:639326
          在線客服 聯系方式

          服務熱線

          18616957973

          主站蜘蛛池模板: 人妻在卧室被老板疯狂进入国产| 国产精品一区二区高清在线| 国产精品户外野外| 一日本道a高清免费播放| 亚洲欧美日韩综合一区在线观看 | 天堂在线www中文| 亚欧洲精品在线视频免费观看 | 日产日韩亚洲欧美综合| 永久免费观看黄网视频| 欧美成人一区二区三区在线观看| 国产精品久久久久久无码| 日本阿v网站在线观看中文| 无码区国产区在线播放| 拍拍拍无挡免费视频| 色屁屁www免费看欧美激情| 性无码专区无码片| 日韩在线不卡免费视频一区| 国产9 9在线 | 欧洲| 亚洲精品欧美综合四区| 麻豆人妻少妇精品无码专区| 国产精品久久久久久久网| 996热re视频精品视频这里| 天堂在线www天堂在线| 亚洲欧美激情在线一区| 日韩无套内射视频6| 又色又爽又黄的gif动态图| 两口子交换真实刺激高潮| 丰满少妇高潮惨叫久久久一| 午夜精品久久久久9999| 天天干天天射天天操| 任你躁国产自任一区二区三区| 日日碰狠狠躁久久躁96| 色偷偷女人的天堂亚洲网| 久久婷婷五月综合色中文字幕| 少妇熟女天堂网av| 国产美女在线精品免费观看网址| 日本mv高清在线成人高清| 日本sm极度另类视频| ww国产内射精品后入国产| 国产成人情侣激情视频| 大香网伊人久久综合网2018|