人源紅色熒光標(biāo)記氧化型低密度脂蛋白

Human DiI-Ox-LDL (Human DiI-Oxidized Low Density Lipoprotein)

人源紅色熒光標(biāo)記氧化型低密度脂蛋白

想了解更多脂蛋白產(chǎn)品的背景知識(shí)，可見(jiàn)MKBio整理的技術(shù)文章：脂蛋白類型與作用機(jī)理。

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搜索關(guān)鍵詞：

HDL；LDL；DiI-LDL；氧化修飾Ox-LDL；乙酰化修飾Ac-LDL；LDL receptor LDL受體；Cholesterol 膽gu醇；Cholesteryl ester (CE) 膽gu醇酯 ；Triglyceride (TG) 甘油三酯；Cardiovascular diseases 心血管疾病；Atherosclerosis (AS) 動(dòng)脈粥樣硬化； 

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溫馨提示：由于脂蛋白的保存周期比較短，約6周。本司一般都是接到訂單后再生產(chǎn)，從而保證客戶拿到最長(zhǎng)效期的產(chǎn)品。所以，我們貨期至少要2天以上。

基本描述：

低密度脂蛋白（Low Density Lipoprotein，簡(jiǎn)稱為LDL）是血液中五種常見(jiàn)脂蛋白之一，由極低密度脂蛋白（VLDL）通過(guò)脂蛋白脂肪酶（LPL）的作用使其喪失部分甘油三酯轉(zhuǎn)化而來(lái)。LDL是主要的膽gu醇和膽gu醇酯轉(zhuǎn)運(yùn)體，占血漿脂蛋白總量的一半以上。LDL通過(guò)受體介導(dǎo)的內(nèi)吞作用被肝臟和其他組織吸收。LDL適用于心血管研究和脂質(zhì)運(yùn)輸研究，也適用于LDL代謝及其與心血管疾病的關(guān)聯(lián)性研究。還能用作細(xì)胞標(biāo)志物和疾病標(biāo)志物。

氧化的LDL（Oxidized LDL，Ox-LDL）是修飾LDL中的一種，還包括乙酰化LDL、以及丙二醛（MDA）、4-羥烯酸（4-HNE）直接結(jié)合的LDL，這些未經(jīng)氧化修飾，僅僅是經(jīng)一般化學(xué)修飾的LDL稱為衍化LDL。兩者都可被清道夫受體識(shí)別，誘導(dǎo)泡沫細(xì)胞的形成。但兩者之間也有些差異，主要表現(xiàn)在：1）細(xì)胞生理功能方面，Ox-LDL可誘發(fā)細(xì)胞毒性作用，影響花生四烯酸代謝，抑制膽gu醇酯化作用等，但衍化LDL無(wú)上述效應(yīng)；2）Ox-LDL消耗LDL內(nèi)源性抗氧化物質(zhì)，使LDL上的維生suE含量下降，而MDA-LDL無(wú)上述效應(yīng)；3）Ox-LDL涉及脂質(zhì)過(guò)氧化反應(yīng)，LDL中的PUFAs被氧化。MDA對(duì)LDL修飾，是直接和ApoB-100結(jié)合成希夫氏堿，脂質(zhì)過(guò)氧化反應(yīng)輕微；4）LDL的氧化修飾中，在氧化程度低時(shí)，ApoB降解；在氧化程度高時(shí)，ApoB又可發(fā)生再聚合。MDA-LDL的修飾中，ApoB無(wú)降解、聚合發(fā)生；5）Ox-LDL 的熒光峰波長(zhǎng)為430nm，而MDA -LDL的熒光峰波長(zhǎng)為460nm。

LDL氧化修飾的方式有很多種，常見(jiàn)的有：1）細(xì)胞介導(dǎo)的LDL氧化修飾，又稱為生物氧化修飾的LDL。如內(nèi)皮細(xì)胞，巨噬細(xì)胞，單核細(xì)胞都具有此功能；2）過(guò)度金屬離子介導(dǎo)的LDL氧化修飾，如Ca²⁺，Fe²⁺等；3）還有其他形式的氧化修飾，包括物理方法如紫外線，或過(guò)氧化物酶催化。

本品是由紅色熒光探針DiI（1,1'-dioctadecyl-3,3,3',3'-tetramethyl-indocarbocyanine perchlorate）標(biāo)記的人源氧化LDL（Human Ox-LDL）。DiI- Ox-LDL具有高受體結(jié)合力，且是一種廣為認(rèn)知的膽gu醇遞呈增強(qiáng)劑。可通過(guò)熒光顯微鏡或流式細(xì)胞儀來(lái)鑒定和觀察細(xì)胞培養(yǎng)物內(nèi)的泡沫細(xì)胞。也可用來(lái)誘導(dǎo)巨噬細(xì)胞的泡沫細(xì)胞形成。本品為無(wú)菌包裝，可用PBS磷酸鹽緩沖液或細(xì)胞培養(yǎng)基直接稀釋使用即可。

產(chǎn)品特性：

1） 濃度：1.0-4.0 mg/ml
2） 外觀：乳狀液體
3） 緩沖液組分：PBS（含EDTA），pH7.2-7.4

保存與運(yùn)輸方法

保存：2-8℃保存，收到貨后6周有效。避免強(qiáng)光直射，不可凍存！

運(yùn)輸：冰袋運(yùn)輸。

注意事項(xiàng)

1） 本品的稀釋工作液極不穩(wěn)定，建議現(xiàn)配現(xiàn)用； 

2） 本品長(zhǎng)期貯存可能會(huì)有沉淀析出，屬于正常現(xiàn)象，低速離心2 min去除沉淀后使用即可；

3） LDL與LDL受體的結(jié)合需要Ca²⁺和Mn²⁺的參與，過(guò)量EDTA的存在會(huì)抑制其結(jié)合；

4） 關(guān)于脂蛋白的更多信息，可見(jiàn)懋康生物整理的脂蛋白（Lipoproteins）產(chǎn)品專題。

5） 為了您的安全和健康，請(qǐng)穿實(shí)驗(yàn)服并戴一次性手套操作。

操作步驟

1) 無(wú)菌條件下，將Human DiI-Ox-LDL用細(xì)胞培養(yǎng)基稀釋至20-40 µg/ml。

2) 加入活細(xì)胞內(nèi)，37℃培養(yǎng)3-6小時(shí)。

3) 孵育結(jié)束，吸去含Human DiI-Ox-LDL的培養(yǎng)基，并用無(wú)探針的培養(yǎng)基洗幾次。

4) 根據(jù)實(shí)驗(yàn)需求用熒光顯微鏡或流式細(xì)胞儀檢測(cè)。

a) 熒光顯微鏡觀察

采用標(biāo)準(zhǔn)的羅丹明激發(fā)：發(fā)射濾光片（或建議使用波長(zhǎng)為：Ex/Em=554nm/571nm）；若需要請(qǐng)使用含3%甲醛的PBS進(jìn)行固定，切勿使用甲醇或丙酮固定，因Dil易溶于有機(jī)溶劑。【注】需設(shè)陽(yáng)性細(xì)胞以做對(duì)照。

b）  流式細(xì)胞分選

胰蛋白mei處理細(xì)胞或者加入EDTA制成單細(xì)胞懸液，選用合適的已標(biāo)記純化細(xì)胞用作陰性和陽(yáng)性對(duì)照，從而進(jìn)行流式分選設(shè)門（gate）。（建議使用波長(zhǎng)為554 nm；Em：571nm）。

相關(guān)產(chǎn)品：

 — —Written/Edited by V. Shallan【版權(quán)歸MKBio懋康所有】

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