Alexa Fluor 350標(biāo)記麥胚凝集素純化蛋白

Alexa Fluor 350 labeled Wheat Germ Agglutinin  

Alexa Fluor 350標(biāo)記麥胚凝集素

產(chǎn)品標(biāo)簽

Alexa Fluor 488-WGA；Alexa Fluor 594- WGA；FITC-WGA 麥胚凝集素；Rhodamine-WGA小麥胚芽凝集素；Plasma membrane質(zhì)模標(biāo)記；Golgi apparatus高爾基體染色；Yeast bud scars酵母出芽痕；

產(chǎn)品信息

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產(chǎn)品描述

麥胚凝集素（Wheat Germ Agglutinin，WGA）是廣泛應(yīng)用于細(xì)胞生物學(xué)的凝集素之一。WGA識(shí)別的糖類受體是N-乙酰葡糖胺（GlcNAc），傾向與N-乙酰葡糖胺的二聚體和三聚體結(jié)合。WGA能結(jié)合含N-乙酰葡糖胺末端或殼二糖的寡糖，這類結(jié)構(gòu)在許多血清和膜來(lái)源糖蛋白中普遍存在。細(xì)菌細(xì)胞壁肽聚糖、甲殼素（幾丁質(zhì)）、軟骨糖胺聚糖和糖脂也能結(jié)合WGA。天然WGA還能通過(guò)N-乙酰神經(jīng)氨酸（唾液酸）殘基與一些糖蛋白相互作用。WGA適用于胰島素受體的純化、血清蛋白和神經(jīng)示蹤。

麥胚凝集素（Wheat Germ Agglutinin，WGA）通常用來(lái)標(biāo)記糖蛋白，用于活細(xì)胞或固定細(xì)胞的質(zhì)膜成像，用于組織切片染色或其它標(biāo)準(zhǔn)的免疫分析實(shí)驗(yàn)。WGA能用作一種革蘭氏染色劑，熒光標(biāo)記革蘭氏陽(yáng)性菌（非革蘭氏陰性菌）。還能用于結(jié)合出芽酵母（比如釀酒酵母）的出芽痕。

本品是Alexa Fluor350標(biāo)記的麥胚凝集素（Alexa Fluor350 labeled Wheat Germ Agglutinin, Alexa Fluor350- WGA），Ex/Em=343/441nm，親和純化所得，基本不含未標(biāo)記的熒光素。建議工作濃度范圍是5-20μg/ml。

產(chǎn)品特性

1） 英文同義名：Wheat Germ Agglutinin, Alexa Fluor 488 Conjugate; Alexa Fluor 488labeledWheat Germ Agglutinin; Wheat germ agglutinin lectin, Alexa Fluor 488 Conjugate; Alexa Fluor 488labeledWGA Lectin;

2） 中文同義名：麥胚凝集素，Alexa Fluor 488標(biāo)記；Alexa Fluor 488標(biāo)記的麥胚凝集素；Alexa Fluor 488標(biāo)記的小麥胚芽凝集素；

3） 糖類特異性：N-乙酰葡糖胺（GlcNAc）

4） 外觀：固體

5） Ex/Em：343/441nm

6） 熒光顏色：藍(lán)色

7） 應(yīng)用：IF、糖生物學(xué)

保存與運(yùn)輸方法

保存：-20℃避光干燥保存，至少1年有效。 

運(yùn)輸：冰袋運(yùn)輸。

注意事項(xiàng)

1） 本品儲(chǔ)存液長(zhǎng)期保存可能會(huì)產(chǎn)生沉淀，使用前請(qǐng)37℃溫育數(shù)分鐘，之后離心吸取上清使用。此操作基本不會(huì)對(duì)產(chǎn)生性能造成負(fù)影響。

2） 熒光染料都存在淬滅的問(wèn)題，保存和操作過(guò)程中注意避光。

3） 為了您的安全和健康，請(qǐng)穿實(shí)驗(yàn)服并戴一次性手套操作。

質(zhì)膜標(biāo)記操作流程

一、儲(chǔ)存液準(zhǔn)備

于使用前，將低溫保存的Alexa Fluor 488-WGA（1mg）置于室溫回溫至少30min，低速離心2-3min，往管內(nèi)加入500µl ddH2O（無(wú)菌）制備2mg/ml儲(chǔ)存液。短時(shí)間使用可保存在2-8℃，長(zhǎng)時(shí)間使用請(qǐng)根據(jù)單次用量分裝保存后置于-20℃保存，避免反復(fù)凍融，至少一個(gè)月穩(wěn)定。

二、標(biāo)記活的真核細(xì)胞

以下是對(duì)貼壁培養(yǎng)在蓋玻片上的活細(xì)胞的通用染色步驟。用戶需根據(jù)不同的模型系統(tǒng)和預(yù)期效果來(lái)優(yōu)化染色時(shí)間和濃度。

2.1制備染色工作液：用合適的生理緩沖液，比如：HBSS（無(wú)酚紅）（Cat#：MS3505-500ML）或HHBS（Cat#：MS3510-500ML），稀釋Alexa Fluor350-WGA（2mg/ml）儲(chǔ)存液到工作濃度，常用工作濃度范圍為5-20μg/ml。使用細(xì)胞培養(yǎng)基稀釋W(xué)GA偶聯(lián)物用于標(biāo)記可能導(dǎo)致增高的非細(xì)胞染色背景。

2.2 細(xì)胞標(biāo)記：加入足量的染色工作液完quan覆蓋蓋玻片上的細(xì)胞。37℃孵育10-30min。

2.3 細(xì)胞清洗：標(biāo)記結(jié)束后，吸走染色工作液，用合適的緩沖液清洗細(xì)胞2次。除非細(xì)胞要做固定，此時(shí)即可在預(yù)熱的HBSS或其它適合于成像的緩沖液中封片。

2.4 【可選】細(xì)胞固定：可能用4%多聚甲醛固定染色好的細(xì)胞，37℃15min，之后用緩沖液清洗，以及做另一種復(fù)染。如有必要用0.2% Triton X-100透化細(xì)胞。

三、標(biāo)記固定的真核細(xì)胞

以下是對(duì)貼壁培養(yǎng)、甲醛固定且未做透化處理細(xì)胞的通用染色步驟。用戶需根據(jù)不同的模型系統(tǒng)和預(yù)期效果來(lái)優(yōu)化染色時(shí)間和濃度。

3.1細(xì)胞固定：4%多聚甲醛固定細(xì)胞，37℃處理15min。

3.2細(xì)胞清洗：用HBSS（不含酚紅）清洗細(xì)胞三次。不要透化細(xì)胞！！！

3.3準(zhǔn)備染色工作液：用合適的生理緩沖液，比如：HBSS（無(wú)酚紅）（Cat#：MS3505-500ML）或HHBS（Cat#：MS3510-500ML），稀釋Alexa Fluor350-WGA（2mg/ml）儲(chǔ)存液到工作濃度，常用工作濃度范圍為5-20μg/ml。使用細(xì)胞培養(yǎng)基稀釋W(xué)GA偶聯(lián)物用于標(biāo)記可能導(dǎo)致增高的非細(xì)胞染色背景。

3.4細(xì)胞標(biāo)記：加入足量的染色工作液完quan覆蓋蓋玻片上的細(xì)胞。室溫孵育10-30min。

3.5細(xì)胞清洗：標(biāo)記結(jié)束后，吸走染色工作液，用合適的緩沖液清洗細(xì)胞2次。此時(shí)可能用0.2% Triton X-100或其它表面活性劑透化細(xì)胞，進(jìn)行接下來(lái)的復(fù)染或抗體標(biāo)記。

3.6細(xì)胞成像：按照實(shí)驗(yàn)需求用另一復(fù)染劑染色，之后在緩沖液內(nèi)封片或抗熒光淬滅劑來(lái)封片。

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 — —Written/Edited by V. Shallan【版權(quán)歸MKBio懋康所有】

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