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          技術(shù)文章
          DNase I 牛胰腺脫氧核糖核酸酶I (懋康生物整理)

          Deoxyribonuclease I (DNase I) 脫氧核糖核酸酶I,來源于牛胰腺

          (凍干粉形式,即用型液體形式,懋康生物)

           

          關(guān)鍵詞:

          脫氧核糖核酸酶I DNase I;核糖核酸酶 RNase;核酸酶 Benzonase;Sigma D5025; Sigma DN25;CAS:9003-98-9;

           

          基本介紹:

          脫氧核糖核酸酶I,英文Deoxyribonuclease I,縮寫DNase I,在大多數(shù)細(xì)胞和組織中都能發(fā)現(xiàn)的一種核酸內(nèi)切酶,偏好切割鄰近嘧啶的磷酸二酯鍵,產(chǎn)生5’端為磷酸基團(tuán)、3’端為羥基的多聚核苷酸(見下圖反應(yīng)流程圖),平均消化產(chǎn)物zui小為多聚四核苷酸。Mg2+存在條件下,DNase I可隨機(jī)識別和切斷DNA任一條鏈上的任意位點(diǎn);而在Mn2+存在條件下,DNase I識別DNA的兩條鏈并在幾乎相同的位點(diǎn)進(jìn)行切割。DNase I可水解多種形式DNA,如單鏈DNA、雙鏈DNA,甚至染色質(zhì)(其切割速率受組蛋白影響)。

          脫氧核糖核酸酶I,英文Deoxyribonuclease I,縮寫DNase I,zui早從胰腺中分離而來,至今哺乳動(dòng)物胰腺也是zui主要的來源之一。DNase I以兩對二硫鍵結(jié)合的多種糖蛋白混合形式存在。zui加的工作范圍是pH 7-8,DNase的活性依賴于Ca2+,并可被二價(jià)金屬離子如Co2+,Mn2+,Zn2+等激活。5mM Ca2+可保護(hù)酶使其不被水解,而0.1mM Ca2+可使酶失活速率降至原來的1/2。

           

          主要應(yīng)用:

          ◇   制備不含DNA的RNA樣本;

          ◇   RT-PCR反應(yīng)前RNA樣本內(nèi)基因組DNA等可能存在DNA污染的去除;

          ◇   T7,T3,SP6等RNA聚合酶催化的體外RNA轉(zhuǎn)錄后DNA模板的去除;

          ◇   DNase I足跡法(DNase I footprinting)研究DNA-蛋白質(zhì)相互作用;

          ◇   缺口平移法標(biāo)記探針用;

          ◇   制備隨機(jī)DNA片段文庫;

          ◇   TUNEL細(xì)胞凋亡檢測中用于剪切DNA制備陽性對照;

           

          我司(懋康生物MKBio)提供的脫氧核糖核酸酶I(DNase I),來源于牛胰腺,通過親和色譜純化所得,不含RNase和蛋白酶污染。為了滿足工業(yè)用戶和科研用戶的不同應(yīng)用需求,我們提供凍干粉(不同比活)和即用型液體形式的DNase I。具體信息如下:

           

          一、脫氧核糖核酸酶I(DNase I)(凍干粉形式,比活力≥2000 Kunit U/mg protein)

          1.1 產(chǎn)品特征:

          1)   CAS NO:9003-98-9

          2)   蛋白純度:≥80%(biuret),色譜純化

          3)   比活力:≥2000Kunit Units/mg protein

          4)   活力定義:25℃,pH5.0條件下DNase催化底物DNA,使每毫升每分鐘ΔA260增加0.001的變化定義為一個(gè)酶活力單位(Kunitz unit)。

          5)   激活劑:多種二價(jià)金屬離子如Mg2+、Mn2+、 Ca2+、Co2+、and Zn2+

          6)   抑制劑:β-巰基乙醇;螯合劑;SDS;肌動(dòng)蛋白;并沒有特異性抑制DNase I酶活的通用抑制劑,比如檸檬酸鹽抑制Mg2+活化的DNase I,但不能影響Mn2+激活的DNase I。

          7)   溶解性:溶于0.15M NaCl(5mg/ml),無色透明溶液

           

          1.2 訂購信息:產(chǎn)品性能媲美Sigma D5025,本品生產(chǎn)至少十年以上,銷售到國內(nèi)各大實(shí)驗(yàn)室,歡迎各大工業(yè)和科研用戶前來咨詢。

          產(chǎn)品名稱

          產(chǎn)品編號

          規(guī)格         

          價(jià)格          

          Deoxyribonuclease I (DNase I) from Bovine Pancreas, ≥2,000 units/mg protein

          脫氧核糖核酸酶I,來源于牛胰腺

          MF0401-15KU   

          15KU

          380

          MF0401-50KU

          50KU

          980

           

          二、脫氧核糖核酸酶I(DNase I)(凍干粉形式,比活力≥500 Kunit U/mg protein)

          2.1 產(chǎn)品特征:

          8)   CAS NO:9003-98-9

          9)   分子量:~31 kDa

          10)同義名:DNase I, Deoxyribonucleate 5’-oligonucleotidohydrolase, Deoxyribonuclease A 脫氧核糖核酸 5′-寡核苷酸水解酶,脫氧核糖核酸酶A

          11)  比活力:≥500 Kunit Units/mg protein

          12)  活力定義:在50µl含40mM Tris-HCl, pH8.0,2.5 mM MgSO4,1mM CaCl2的反應(yīng)緩沖體系中,37℃,10min內(nèi)*降解1µg λ-DNA所需的酶量即為一個(gè)活力單位。此反應(yīng)條件下得到的一個(gè)單位DNase活力約等于一個(gè)Kuntiz unit。

           

          2.2 訂購信息:產(chǎn)品性能媲美Sigma DN25。比活低于MF0401(≥2,000 Kunit U/mg protein),價(jià)格更加經(jīng)濟(jì)。

          產(chǎn)品名稱

          產(chǎn)品編號

          規(guī)格 

          價(jià)格        

          Deoxyribonuclease I (DNase I) from Bovine Pancreas, ≥500 units/mg protein  

          脫氧核糖核酸酶I,來源于牛胰腺

          MF0402-10MG   

          10MG     

          250

          MF0402-50MG

          50MG

          680

           

          三、脫氧核糖核酸酶I(DNase I)(即用型溶液)

          該試劑盒形式提供,其中DNase I以即用型溶液(1U/μl) 形式提供,酶經(jīng)過嚴(yán)格質(zhì)控能*的消化模板;還提供10× Reaction Buffer和10× Stop Solution,節(jié)省了試劑配制的時(shí)間,用起來更加快捷。

           

           — —Written/Edited by V. Shallan【版權(quán)歸MKBio懋康所有】

           

          上海懋康生物科技有限公司是一家涉足于生命科學(xué)和生物技術(shù)領(lǐng)域研究的試劑、儀器和實(shí)驗(yàn)室消耗品與實(shí)驗(yàn)服務(wù)工作,主要從事細(xì)胞生物學(xué)、植物學(xué)、分子生物學(xué)、免疫學(xué)、生物化學(xué)、蛋白組學(xué)。生物制藥與診斷試劑研發(fā)生產(chǎn)等領(lǐng)域。 本公司秉承“以人為本,以誠為信、合同守信”的經(jīng)營理念。堅(jiān)持"品質(zhì)保障"的原則為廣大客戶提供產(chǎn)品。 

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